造血细胞超低温保存箱

  造血细胞的保存始于20世纪20年代末80年代初，短期保存是在4度下进行。在这种温度下，离体细胞仍然保持着新陈代谢，通常只能保存48～72 h。而超低温(零下80～零下196度)时，细胞内新陈代谢减慢乃至停止，则可以较长时间保存。细胞的超低温保存在降温和复温过程中，其内外环境会发生一系列改变，会造成冷冻损伤，而加人细胞保护剂可减轻这种损伤，细胞复温后可以维持初始形状和生理功能。细胞保护剂一般分为高分子的非穿透性保 护剂 (如HES、白蛋白等)和低分子的穿透性保护剂 (如 DMSO、甘油等)。造血细胞的保存初期多用10%DMSO为保护剂的程控降温液氮液态保存，保存的骨髓细胞15年后造血细胞活力良好。程控降温是基于造血细胞为有核细胞，在细胞温度进人液氮内温度前，需以1～2℃／rain降温速率降温至-60度或-80度。这种降温方法需特殊程控降温仪，不仅操作费时，且成本大，特别是对小样本的保存是很不经济的，因此限制了它的使用。我们在20世纪80年代，采用10%的DMSO为保护剂，-80度低温冰箱降温保存骨髓 。

  研究表明，从保护剂的角度看，5%DMSO-6 %HES优于10%DMSO。这一效果在用低温保存箱?降温与保存中更能得到充分体现。这可能与DM-SO对细胞有毒性作用有关。有学者报道，即使在4度下，骨髓细胞接触5 rain的10%DMSO后，CFU-GM将损失25%，30min后损失可超过75%。我们的结果显示，这种损伤现象没有那么严重，但5%DMSG-6%HES明显减轻了这种损伤。

  低温保存箱降温液氮保存和低温保存箱降温并保存，与自控程序降温液氮保存比，在1年内造血细胞保存效果均良好。本研究20例患者的外周血干细胞在1年内均已进行了移植，全部重建造血功能 。另有文献报道，如果造血细胞需要长期保存，选用低温保存箱降温时，则以液氮保存为好，也说明-80度的低温保存箱降温能达到慢速降温的效果。细胞在这种温度下不宜长期存放，是否说明细胞在此温度下仍保持一定程度的新陈代谢，值得进一步研究。 细胞的低温保存是在液氮液态下保存还是在液氮气态下保存仍有争论，过去多是推荐液氮液态保存，现主张在液氮气态下保存。细胞复温后，细胞内保护剂也应立即稀释或去除，如果细胞是给患者治疗用，细胞复温后应立即应用，在 30rain内输人体内。

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